谷胱甘肽标签融合蛋白纯化试剂盒

产品编号：ZDK-009Z                                                                                                                                                                     规格：4ml

该产品由军事医学科学院研发监制

一、 原理

    含有谷胱甘肽S-转移酶(GST)的融合蛋白质或多肽可以与谷胱甘肽-琼脂糖凝胶结合，用适当的缓冲液冲洗去除杂蛋白后，再用还原型谷胱甘肽洗脱回收含有谷胱甘肽S-转移酶(GS T)的融合蛋白质或多肽。

二、 试剂盒组成

A. 层析柱                             1根        

B. 谷胱甘肽-琼脂糖凝胶4B  4ml

C. 还原型谷胱甘肽               1g     

三、 纯化方法

1．取2ml谷胱甘肽-琼脂糖凝胶4B装柱，凝胶自然沉降。

2．用5-10倍柱床体积的水洗层析柱，再用5倍柱床体积的结合缓冲液（20mmol/L磷酸盐缓冲液,200mmol/L NaCl,pH 7.8）平衡层析凝胶柱。

3. 将适量细胞裂解液（20mmol/L磷酸盐缓冲液,200mmol/L NaCl,pH 7.8）12000g离心，取上清，上样，流速为0.1ml/min。

4．用5-10倍柱床体积的结合缓冲液洗层析柱，流速0.1ml/min。

5．分别用含不同浓度的还原型谷胱甘肽洗脱缓冲液（50mmol/L Tris.HCl,pH8.0, 5mmol/L 还原型谷胱甘肽）进行洗脱，流速0.1ml/min，收集各洗脱峰。（还原型谷胱甘肽的浓度可以依据不同的融合蛋白进行调整）。

6．SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分析融合蛋白纯度。

四、 保存

2-8℃下保存一年。