2、 标准品(冻干品):每瓶标准品加入标准品稀释液1mL,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为10ng/mL。准备7个稀释标准品的EP管,每个EP管中加入500μL的标准品稀释液,如图所示依次倍比稀释成10ng/mL,5ng/mL,2.5ng/mL,1.25ng/mL,0.625ng/mL,0.312ng/mL,0.156ng/mL,标准品稀释液(0ng/mL)直接作为空白孔。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
3、 检测稀释液A及检测稀释液B:用6mL蒸馏水或去离子水将6mL浓检测液A及B稀释至12mL,进行2倍稀释,稀释后的工作液不宜进行冷冻保存。(考虑到实验过程中的试剂损失,试剂瓶中稀释液的量多于6ml,因此在每次实验中,必须用移液器准确吸取实验所需量,并在新的容器中进行倍比稀释。)
4、 检测溶液A及检测溶液B:Detection A 及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理,以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。临用前分别以检测稀释液A或B1:100稀释(如:10μL检测溶液A/990μL检测稀释液A),充分混匀,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100μL/孔),实际配制时应多配制0.1-0.2mL。