点击图片查看原图
小鼠单克隆抗体简介：
单克隆抗体是由激活的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合而成的单克隆杂交瘤细胞产生的。小鼠单克隆抗体是常见的单克隆抗体。同时小鼠也是生物学和医学领域中常见的模式动物之一。
· 高度特异性
· 高度均一性
· 可快速、大量、连续生产
· 应用领域广泛，涵盖检测治疗等多个领域
· 制备方案和工具成熟
· 应用前景良好
安必奇的优势：
· 节省宝贵时间
· 新型佐剂MagicTM免疫佐剂，仅需21天即可引起免疫效应
· 阳性杂交瘤细胞的筛选平台----Omni-HybridomaTM platform
· MagicTM hybridoma growth factor提高细胞融合成功率存活率，使抗体稳定表达
我们的小鼠单克隆抗体：
· pM级的亲和性和高特异性
· 对多种抗原均有效果
· 可以识别区分转录后修饰（PTM）
· 适用于甲醛固定的免疫组化
· 可大量制备具有生物活性的抗体
服务具体内容：
可使用小分子、多肽、修饰多肽、蛋白、融合蛋白、修饰蛋白等作为抗原进行单克隆抗体制备。同时，我们也提供抗原制备服务，包括DNA合成、质粒构建、蛋白表达、蛋白纯化、蛋白修饰、多肽合成、多肽修饰、多肽与载体蛋白交联、小分子结构分析及与载体蛋白交联等。如客户需要，我们还提供抗体提纯及抗体鉴定服务。
（所涉及转录后修饰一般包括：磷酸化、甲基化、乙酰化、泛素化修饰等）
小鼠单克隆抗体制备流程：
|
步骤 |
服务内容 |
周期 |
| 1. 动物免疫 | 1. 免疫5只小鼠，进行2-3次免疫； 2. 采集5只小鼠血清，分别做ELISA检测； 3. 提供鉴定报告。 |
4-6周 |
| 2.杂交瘤制备 | 效价合格后，经客户同意后，进行融合实验： 1. 选取血清效价高的小鼠的取脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合。 2．有限稀释融合细胞，96孔板克隆化； 3. HAT筛选杂交瘤细胞; 4. 免疫原检测，检测出抗原阳性1-10个阳性细胞，扩大培养至48孔板； 5. 挑取阳性克隆扩增，微量-80度冻存细胞【冻存细胞可保存1年以上】； 6. 提供客户1ml上清/阳性克隆，供客户检测，检测结果20天内反馈。 客户根据自己的ELISA检测、功能检测结果，挑选阳性克隆；丢弃其余克隆。如果客户需要保存其余克隆，需要提前沟通，另行约定费用和保存方式。 |
4-6周 |
| 3.亚克隆 | 根据客户的要求，选取阳性克隆进行亚克隆： 1. 每个克隆做96孔板有限稀释培养，ELISA筛选阳性亚克隆； 2. 阳性克隆扩增，少量-80度冻存细胞； 3. 提供1ml杂交瘤细胞上清，供客户进行检测；检测结果请在20天内反馈。 套餐中包括总共不超过3个阳性亚克隆细胞，默认根据结果好的3个阳性亚克隆，放大至T-25 Flask培养，ELISA再次确认后进行细胞冻存，每个亚克隆冻存3管细胞。 |
1-3周 |
| 4. 腹水制备(可选) | 1. 客户选取的杂交瘤细胞制备腹水，免疫2只小鼠，Protein A纯化腹水，ELISA检测效价； 2. 提供纯化后杂交瘤细胞，<5mg/clone； 3. 提供实验报告和剩余腹水抗体； 注：亦可选择细胞上清纯化。 |
1-3周 |
| 5. 套餐外阳性杂交瘤细胞的选取(可选) | 套餐(3个亚克隆)之外的其它备选细胞, 若客户需要亚克隆,每额外增加一个亚克隆, 需要额外支付的费用。 | N/A |
| 6.抗体配对（可选） | 1.若干株阳性单抗两两组合，进行夹心ELISA实验； 2.根据夹心ELISA实验结果挑选配对抗体； 3.出具相关的检测报告提供给客户。 |
2-4周 |
| 7.功能验证（可选） | 可以根据客户对抗体的要求进行ELISA、WB等实验的检验验证，确定制备获得的抗体是否可用于该实验。 | 1-3周 |
| 8.保证型服务（可选） | 重复前述实验（杂交瘤制备，抗体纯化和检测实验。如有必要则重复动物免疫实验）直至获得符合要求的抗血清或纯化抗体。 | N/A |
-
动物在SPF条件下饲养
-
使用耗材和试剂（Corning，Gibco，HyClone或具有同等质量的品牌）
您将收获：
-
实验报告和鉴定/验证报告
-
阳性杂交瘤上清（用于客户鉴定和挑选）
-
3株阳性细胞株亚克隆（或选择直接阳性克隆扩大培养）
-
纯化的高特异性与高亲和性的小鼠源单克隆抗体