蛋白质翻译后修饰是以纯化或者复杂的蛋白质样本为研究对象,尽可能对样本中发生修饰的蛋白质进行定性分析。一般常见的修饰类型主要有磷酸化、甲基化、乙酰化、生物素化、磷酸化、糖基化、泛素化、二硫键等多种翻译后修饰类型。同时,我们也可以根据客户需要提供定制化服务。
技术原理
蛋白质氨基酸序列的特定位置可以与化学基团或者小分子量的蛋白共价结合从而发生蛋白质翻译后修饰(post-translational modifications,PTMs),相较于没有发生修饰的蛋白,PTMs 会导致特定序列分子量的增加,通过质谱检测就可以检测到特定的蛋白翻译后修饰。质谱可以分辨蛋白质修饰前和修饰后分子量上的变化,因此只要知道靶蛋白翻译后修饰前后分子量的变化,就能对翻译后修饰方式进行鉴定和定量。
技术流程技术特点
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与传统方法比较,没有放射性的危险;
样本要求
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SDS-PAGE胶条:银染、考染条带可见;
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蛋白质溶液:蛋白质总量>5μg,浓度>0.1μg/μl。
技术平台
Thermo Scientific Q Exactive
案例解析
同源异型框蛋白 Msx1 的两个新的磷酸化位点的鉴定