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CRL-11609 RWPE-1 人正常前列腺上皮细胞

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最后更新: 2013-04-22 13:54
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CRL-11609 RWPE-1 人正常前列腺上皮细胞;原代细胞|细胞系|细胞株|菌种;细胞库管理规范,提供的细胞株背景清楚,提供参考文献和最优培养条件,


CRL-11609 RWPE-1 人正常前列腺上皮细胞 的详细介绍

CRL-11609 RWPE-1 人正常前列腺上皮细胞

Growth Properties: adherent

Organism: Homo Sapiens (human)

Propagation: Complete growth medium:K-SFM +0.05mg/ml BPE + 5ng/ml EGF

Temperature: 37.0℃

Atmosphere: air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%

注:K-SFM (GIBCO  17005-042)含有BPE和EGF

Subculturing: Protocol: Remove medium, and rinse with PBS (pH7.2). Remove the solution and add 1 to 2 ml 0.05% trypsin-0.02% EDTA solution .Allow the flask to sit at 37.0℃ until the cells detach.Add fresh culture medium, aspirate and dispense into new culture flasks.
Subculturing ration: 1:3 to 1:5 is recommended.
Medium renewal: Every 2  days.
Preservation: Freeze medium: Complete growth medium + 40% NBS + 10% DMSO
Storage temperature: liquid nitrogen vapor temperature.

1.      接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。

2.      用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。

3.      严格无菌操作,打开细胞培养瓶。

4.      将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。

5.      用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。

6.      1000rpm,5min离心,重悬细胞。

7.      换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。
 

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